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ELISA試劑盒選擇方法和注意事項
更新時間:2018-05-30   點擊次數:1496次

ELISA試劑盒留意事項:
1.請每次測定的一起做規范曲線,應該做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于規范品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(n倍)后再測定,核算時請zui終乘以總稀釋倍數(×n×5)。
2.封板膜只限一次性運用,以避免交叉污染。
3.底物請避光保存。
4.嚴厲按照說明書的操作進行,試驗成果判定有必要以酶標儀讀數為準.
ELISA試劑盒選擇辦法:
(1)酶符號抗體作業濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶符號抗體部份)。然后再固定其它條件或采納“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶符號抗體分別為不同的稀釋度)在正式試驗體系里地滴定其作業濃度。
(2)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反響,而自身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌效果,應留意防護。有條件者應運用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是現在較為滿足的供氫體。底物效果一段時刻后,應參加強酸或強堿以停止反響。一般底物效果時刻,以10-30分鐘為宜。底物運用液有必要新鮮制造,尤其是H2O2在臨用前參加。

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